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化學發(fā)光免疫測定(Chemiluminesent Immunoassay,CLIA)是免疫測定技術繼酶免技術(EIA)、放免技術(RIA)、熒光免疫技術(FIA)和時間分辨熒光免疫技術(TRFIA)之后發(fā)展的一項新興測定技術。要談化學發(fā)光免疫測定技術就必須先談化學發(fā)光。
化學發(fā)光技術是近二、三十年來發(fā)展起來的一種測定方式,其利用化學反應釋放的自由能激發(fā)中間體(常用堿性磷酸酶-金剛烷胺),使其從激發(fā)態(tài)回到基態(tài),當中間體從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時會釋放等能級的光子,對光子進行測定而進行定量分析?;瘜W發(fā)光具有熒光的特異性,同時不需要激發(fā)光,就避免了熒光分析中激發(fā)光雜散光的影響有很高的靈敏度,并且不象放射分析那樣存在強烈的環(huán)境污染和健康危害,是一種非常的定量分析方法。
雖然化學發(fā)光具備很高的特異性和很小的干擾,但化學分析本身的不特異性,制約了整個方法的使用。因此,如同RIA、FIA等一樣利用免疫反應的特異性和化學發(fā)光本身的信號特異性形成了目前所說的化學發(fā)光免疫測定(CLIA)技術。
CLIA是一種高度敏感的微量測定技術,凡具有抗原性的物質(包括半抗原)都可以用CLIA測定。其起步于80年代初,快速發(fā)展于90年代,在國外CLIA的應用處于蓬勃發(fā)展的階段,其具備以下特點
①高度敏感,極限達10-17-10-19M/L,遠高于RIA、EIA,與TRFIA相當?shù)萒RFIA便宜。
?、谔禺愋詮姡貜托院肅.V.<5%。
?、蹨y定范圍寬,可達7個數(shù)量級。
?、茉噭┓€(wěn)定性好,有效期6-12月。
?、莶僮骱唵?,易于自動化。
在對環(huán)保很重視的國家,CLIA成了取代RIA的方法。